सेल कल्चर उपभोग्य सामग्रियों का चयन कैसे करें?
1. खेती की विधि निर्धारित करें
विभिन्न विकास विधियों के अनुसार, कोशिकाओं को दो श्रेणियों में विभाजित किया जाता है: अनुवर्ती कोशिकाएँ और निलंबन कोशिकाएँ, और ऐसी कोशिकाएँ भी होती हैं जो अनुवर्ती और निलंबन दोनों में विकसित हो सकती हैं, जैसे SF9 कोशिकाएँ।सेल कल्चर उपभोग्य सामग्रियों के लिए विभिन्न कोशिकाओं की अलग-अलग आवश्यकताएँ होती हैं।अनुवर्ती कोशिकाएँ आम तौर पर टीसी-उपचारित उपभोग्य सामग्रियों का उपयोग करती हैं, जबकि निलंबन कोशिकाओं में ऐसी आवश्यकताएं नहीं होती हैं, लेकिन टीसी-उपचारित उपभोग्य वस्तुएं निलंबन कोशिका वृद्धि के लिए भी उपयुक्त होती हैं।उपयुक्त उपभोग्य सामग्रियों का चयन करने के लिए, सेल कल्चर विधि को पहले सेल प्रकार के अनुसार निर्धारित किया जाना चाहिए।
2. उपभोग्य सामग्रियों के प्रकार का चयन करें
सामान्य सेल कल्चर उपभोग्य सामग्रियों में सेल कल्चर प्लेट, सेल कल्चर व्यंजन, सेल कल्चर स्क्वायर फ्लास्क, सेल रोलर बोतल, सेल फैक्ट्री, शामिल हैं।सीरोलॉजिकल पिपेट, आदि इन उपभोग्य सामग्रियों की संस्कृति क्षेत्र, उपयोग विधि और समग्र संरचना के संदर्भ में अपनी विशेषताएं हैं।कल्चर बोतल एक बंद कल्चर है, जो प्रदूषण को कम कर सकती है;संस्कृति की थाली औरपेट्री डिशअर्ध-खुली संस्कृति हैं, जो नियंत्रण प्रयोगों और ढाल प्रयोगों के लिए सुविधाजनक है, लेकिन इससे जीवाणु संदूषण होने की भी अधिक संभावना है, जिसके लिए उच्च ऑपरेटरों की आवश्यकता होती है।कुछ उपभोग्य सामग्रियों को विशेष उपकरणों के साथ संचालित करने की भी आवश्यकता होती है।उदाहरण के लिए, सेल शेकर को कोशिकाओं को हवा के साथ बेहतर संपर्क बनाने के लिए शेकर के कंपन का उपयोग करने की आवश्यकता होती है, और 40-लेयर सेल फैक्ट्री को स्वचालित उपकरण की आवश्यकता होती है।संक्षेप में, उपभोग्य सामग्रियों के प्रकार का चयन करते समय, इसे प्रयोगात्मक आवश्यकताओं और व्यक्तिगत परिचालन प्राथमिकताओं के संयोजन में व्यापक रूप से विचार किया जाना चाहिए।
1.मल्टी-वेलसेल कल्चर प्लेट्स: मल्टी-वेल सेल कल्चर प्लेटों का उपयोग करने वाले सेल कल्चर प्रारूप लोकप्रियता प्राप्त कर रहे हैं क्योंकि वे कई गतिशील चर के अध्ययन की सुविधा देते हैं, प्रयोग के समय को कम करते हैं और महंगे अभिकर्मकों को बचाते हैं।मानक उच्च-थ्रूपुट माइक्रो-प्लेट्स के अलावा, 3डी और ऑर्गेनोटाइपिक सेल कल्चर की सुविधा के लिए विशेष माइक्रो-प्लेट्स विकसित किए गए हैं।
1) छिद्रों की संख्या
वांछित फ्लक्स स्तर पर निर्भर करता है, और मशीन सहायता के साथ या उसके बिना।6, 12, 24 और अन्य कम अच्छी सेल कल्चर प्लेटें मैन्युअल रूप से जोड़ी जा सकती हैं।96-अच्छी तरह सेसेल कल्चर प्लेटें, इलेक्ट्रिक पिपेट या मशीन की मदद लेना बेहतर है।
2) छेद का आकार
सेल प्रकार और डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोग के आधार पर कुएं के तल को समतल (एफ-बॉटम), गोल (यू-बॉटम), या पतला चुना जा सकता है।
3) प्लेट का रंग
छिद्रित प्लेट का रंग भी अनुप्रयोग से निकटता से संबंधित है।यदि कोशिकाओं को चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप या नग्न आंखों से देखा जाता है, तो एक पारदर्शी मल्टी-वेल सेल कल्चर प्लेट का चयन किया जा सकता है।हालाँकि, दृश्यमान प्रकाश स्पेक्ट्रम (जैसे ल्यूमिनसेंस या प्रतिदीप्ति) के बाहर के अनुप्रयोगों के लिए, बहु-अच्छी तरह से रंगीनसेल कल्चर प्लेटें(जैसे सफ़ेद या काला) आवश्यक हैं।
4) भूतल उपचार
कौन सा कोशिका सतह उपचार चुनना है यह इस पर निर्भर करता है कि आप निलंबन या अनुवर्ती कोशिकाओं का संवर्धन कर रहे हैं या नहीं।
2.सेल कल्चर फ्लास्क: संवर्धन क्षेत्र 25-225 सेमी² तक होता है, और वे आम तौर पर सतह-संशोधित होते हैं, जो कोशिका आसंजन और विकास के लिए उपयुक्त होते हैं।225 सेमी²और 175 सेमी²सेल कल्चर फ्लास्कज्यादातर बड़े पैमाने पर संस्कृति (जैसे मोनोक्लोनल सेल संस्कृति, आदि) के लिए उपयोग किया जाता है, 75 सेमी² का उपयोग ज्यादातर सामान्य सेल प्रयोगों (सामान्य मार्ग, कोशिकाओं का संरक्षण, प्रयोगों के लिए कोशिकाओं, आदि) के लिए किया जाता है, 25 सेमी² का उपयोग आम तौर पर इसके लिए किया जा सकता है। जब कम कोशिकाएँ हों तो कोशिकाओं या कल्चर को पुनर्जीवित करने के लिए उपयोग किया जा सकता है, और प्राथमिक कोशिकाएँ बनाते समय, क्रॉस-संदूषण से बचने के लिए कई बोतलों का उपयोग किया जा सकता है।
3.एर्लेनमेंयर फ़्लास्क: सेल फ़ैक्टरियों और सेल रोलर बोतल जैसी उपभोग्य सामग्रियों की तुलना में, इसका सेल कल्चर क्षेत्र छोटा है और यह एक किफायती सेल कल्चर उपकरण है।फ्लास्क की बोतल बॉडी पॉलीकार्बोनेट (पीसी) या पीईटीजी सामग्री से बनी होती है।अद्वितीय त्रिकोणीय आकार का डिज़ाइन पिपेट या सेल स्क्रैपर के लिए बोतल के कोने तक पहुंचना आसान बनाता है, जिससे सेल कल्चर ऑपरेशन अधिक सुविधाजनक हो जाता है।एर्लेनमेंयर फ़्लास्ककैप उच्च शक्ति वाली एचडीपीई सामग्री से बनी है, जिसे सीलिंग कैप और सांस लेने योग्य कैप में विभाजित किया गया है।सीलिंग कैप का उपयोग गैस और तरल की सीलबंद संस्कृति के लिए किया जाता है।सांस लेने योग्य टोपी बोतल टोपी के शीर्ष पर एक हाइड्रोफोबिक फिल्टर झिल्ली से सुसज्जित है।यह सूक्ष्मजीवों के प्रवेश और निकास को रोकता है, प्रदूषण को रोकता है और गैस विनिमय सुनिश्चित करता है, ताकि कोशिकाएं या बैक्टीरिया अच्छी तरह से विकसित हो सकें।
शंक्वाकार शेक के सामान्य आकारएर्लेनमेयर फ्लास्क125ml, 250ml, 500ml, 1000ml और हैं3L,5L उच्च दक्षता एर्लेनमेयर फ्लास्क, माध्यम की क्षमता का निरीक्षण करने और कोशिकाओं की वृद्धि स्थिति को समझने के लिए, बोतल के शरीर पर एक स्केल मुद्रित किया जाएगा।सेल कल्चर को बाँझ वातावरण में किया जाना आवश्यक है।इसलिए, बिना DNase, बिना RNase और बिना किसी पशु-व्युत्पन्न सामग्री के प्रभाव को प्राप्त करने के लिए, सेल विकास के लिए अच्छी स्थिति प्रदान करने के लिए एर्लेनमेयर फ्लास्क को उपयोग में लाने से पहले विशेष नसबंदी उपचार से गुजरना होगा।परिवेश.
4. बहु-परतसेल फैक्ट्री: सेल फैक्ट्री औद्योगिक बैच उत्पादन, जैसे टीके, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी या फार्मास्युटिकल उद्योग के लिए उपयुक्त है, लेकिन प्रयोगशाला संचालन और बड़े पैमाने पर सेल संस्कृति के लिए भी उपयुक्त है।सुविधाजनक और व्यावहारिक, प्रभावी ढंग से प्रदूषण से बचें।सीलबंद कवर के साथ सेल फैक्ट्री: कवर में कोई वेंटिलेशन छेद नहीं है, और इसका उपयोग मुख्य रूप से इनक्यूबेटर और ग्रीनहाउस जैसी कार्बन डाइऑक्साइड रहित स्थितियों में किया जाता है।सीलबंद कवर वाली सेल फ़ैक्टरी बाहरी बैक्टीरिया के आक्रमण को रोक सकती है और कोशिका वृद्धि के लिए एक अच्छा विकास वातावरण बनाने में मदद कर सकती है।सांस लेने योग्य कवर: कवर के शीर्ष पर वेंटिलेशन छेद होते हैं, जो मुख्य रूप से कार्बन डाइऑक्साइड वातावरण में उपयोग किए जाते हैं।वेंटिलेशन छेद पर्यावरण में कार्बन डाइऑक्साइड को सेल फैक्ट्री में प्रवेश करने की अनुमति देते हैं, जिससे सेल विकास के लिए उपयुक्त विकास स्थितियां बनती हैं।1 परत, 2 परत, 5 परत, 10 परत, 40 परत हैंसेल कारखानेउपलब्ध।
5.सेल कल्चररोलर बोतल: 2L और 5L रोलर बोतलें विभिन्न प्रकार के अनुवर्ती सेल कल्चर और सस्पेंशन सेल कल्चर के लिए उपयुक्त हैं, जिनमें वेरो सेल, HEK 293 सेल, CAR-T सेल, MRC5, CEF सेल, पोर्सिन एल्वोलर मैक्रोफेज, मायलोमा सेल, DF-1 सेल शामिल हैं। एसटी कोशिकाएँ, पीके15 कोशिकाएँ, मार्क145 कोशिकाएँ अन्य अनुवर्ती कोशिकाएँ।यह सीएचओ कोशिकाओं, कीट कोशिकाओं, बीएचके21 कोशिकाओं और एमडीसीके कोशिकाओं जैसे निलंबन कोशिकाओं की स्थिर संस्कृति के लिए भी उपयुक्त है।
3. उपभोग्य सामग्रियों की विशिष्टताओं का चयन करें।
बड़े पैमाने के सेल कल्चर प्रयोगों के लिए समर्थन के लिए बड़े कल्चर क्षेत्र वाले उपभोग्य सामग्रियों की आवश्यकता होती है, जबकि छोटे पैमाने के प्रयोगों में छोटे क्षेत्र वाले उपभोग्य सामग्रियों का चयन किया जाता है।सेल फैक्ट्रियों का उपयोग ज्यादातर बड़े पैमाने पर सेल कल्चर के लिए किया जाता है, जैसे वैक्सीन उत्पादन, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी, फार्मास्युटिकल उद्योग, आदि;कल्चर प्लेटें, बर्तन और फ्लास्क प्रयोगशालाओं में छोटे पैमाने के सेल कल्चर के लिए उपयुक्त हैं;सस्पेंशन सेल कल्चर के अलावा, फ्लास्क मध्यम तैयारी, मिश्रण और भंडारण के लिए भी कर सकता है।सेल कल्चर स्केल के अनुसार उपभोग्य सामग्रियों की विशिष्ट विशिष्टताएँ निर्धारित करें।
उपयुक्त सेल कल्चर उपभोग्य वस्तुएं अच्छे सेल विकास को सुनिश्चित करने का आधार हैं, और प्रयोगात्मक प्रक्रिया को तेज करने और कल्चर प्रभाव को सुनिश्चित करने की कुंजी भी हैं।चयन में, सेल कल्चर विधि, कल्चर स्केल और प्रयोगशाला स्थितियों जैसे कारकों पर व्यापक रूप से विचार किया जाना चाहिए।सेल कल्चर करते समय हमें अन्य उपभोग्य सामग्रियों का उपयोग करने की आवश्यकता होती है, उदाहरण के लिए,सेलडिस्क का फ्लेक वाहक&सेलडिस्क का गोलाकार वाहक,पिपेट युक्तियाँ,सीलिंग फिल्म,पिपेट, आदि, लुओरोन भी प्रदान कर सकते हैं।
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